تکثیر یک cdna از توکسین عقرب های خانواده بوتیده بوسیله rt-pcr

در اکثر نقاط ایران، بویژه استان خوزستان، عقرب زدگی مشکلی جدی می باشد. در خوزستان، بیشتر موارد عقرب گزیدگی ناشی از عقرب های خانواده بوتیده می باشد بطوریکه 41 درصد موارد به عقرب آندروکتونوس کراسیکودا تعلق دارد. زهرعقرب شامل ترکیبات فعال بیولوژیک مختلفی از جمله انواع مختلف توکسین ها می باشد که هر کدام از آنها توسط ژن مخصوص به خود کد می شوند. اطلاعات ژنتیکی در مورد تعیین توالی ژن های کد کننده توکسین های عقرب های خانواده بوتیده استان خوزستان در بانک بین المللی ژن موجود نیست. هدف از این پژوهش تکثیر cdna کد کننده یک نروتوکسین از غده زهر عقرب های خانواده بوتیده می باشد. نمونه های عقرب توسط آزمایشگاه رفرانس عقرب موسسه رازی اهواز تهیه و شناسایی شدند. با استفاده از محلول rnxtm ، مجموع rna از غده زهر گونه های مزوبوتوس یوپیوس، هوتنتوتا زاگروسنسیس، هوتنتوتا سلسئی و آندروکتونوس کراسیکودا استخراج و غلظت rna استخراج شده از هر نمونه توسط دستگاه اسپکتروفوتومتر اندازه گیری شد. سپس به منظور تکثیر cdna کد کننده یک نروتوکسین، آغازگرهای دژنرتیو طراحی شدند. در ادامه با استفاده از تکنیکrt-pcr و پس از بهینه سازی شرایط pcr، قطعه cdna با طولی حدود bp 241 از غده زهر عقرب آندروکتونوس کراسیکودا تکثیر گردید.